Deteksi populasi Cd3+Cd4+Cd25+Foxp3+ T-regulator pada Limpa Mencit Galur Balb/c dan Swiss-webster yang Mudah dan Cepat dengan Metode Flow Cytometry

Yudy Tjahjono, Hendy Wijaya, Senny Yesery Esar, Caroline Caroline, Nico Jafet, I Made Andika Bara Kusuma, Oryza Chrisantia, Maria Theresia Primadewy Bhendy, Sindi Siska Palpialy, Shellin Soehadi, Yufita Ratnasari Wilianto

Abstract


Sel T-regulator (Treg) memainkan peran kunci dalam mengendalikan autoimunitas, respon alergi, peradangan, dan respons terhadap infeksi. Sel T Cd4+ yang secara konstitutif mengekspresikan Cd25 dan protein forkhead 3 (Foxp3; yaitu, Cd3+Cd4+Cd25+Foxp3+) atau disebut juga sebagai Treg fungsional, telah terbukti memainkan peran utama dalam pemeliharaan toleransi dan homeostasis imun, sehingga deteksi Treg fungsional sangat penting dilakukan sebagai salah satu parameter imunomodulasi. Penelitian ini bertujuan untuk mendeteksi populasi sel Treg (Cd3+Cd4+Cd25+Foxp3+) pada organ limpa mencit galur Balb/c dan Swiss-webster dengan menggunakan metode yang mudah, cepat, serta terjangkau. Metode deteksi sel Treg dilakukan dengan cara isolasi organ limpa mencit Balb/c dan Swiss-webster kemudian dilakukan preparasi dan deteksi sel menggunakan instrumen flow cytometry. Hasil populasi sel Treg yang didapatkan berturut-turut pada mencit Balb/c dan Swiss-webster adalah 2,02 0,36% dan 3,14 1,64% dari total populasi yang dideteksi dengan hanya membutuhkan waktu 145 menit sejak pembedahan. Berdasarkan hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa pengamatan populasi sel Treg pada splenosit mencit galur Balb/c dan Swiss-webster dengan flow cytometry dapat dilakukan dengan mudah dan praktis dengan pewarnaan kombinasi antibodi yang tertera pada manuskrip ini. Selain itu, metode pewarnaan yang tertera dapat digunakan sebagai salah satu acuan untuk mendeteksi imunomodulator pada berbagai model hewan coba yang menggunakan mencit galur Balb/c dan Swiss-webster, khususnya yang berhubungan dengan populasi sel Treg.


Save to Mendeley


Keywords


Sel Treg; Limpa; Flow cytometry; Isolasi

Full Text:

PDF

References


Georgiev, P., Charbonnier, L.M., and Chatila, T. A., 2019, Regulatory T Cells: The Many Faces of Foxp3, Journal of Immunology, 39(6): 1-18.

Gregorczyk, I., Ma?lanka, T., 2019, Effect of selected non-steroidal anti-inflammatory drugs on activation induced CD25 expression on murine CD4+ and CD8+ T cells: an in vitro study, Experimental immunology, 44(22) : 109-118.

Josefowicz, S.Z., Lu, L.F., and Rudensky, A. Y., 2012, Regulatory T Cells: Mechanisms of Differentiation and Function, Annu Rev Immunol.

Okeke, E.B., Okwor, I., Mou, Z., Jia, P., Uzonna, J.E., 2013, CD4+ CD25+ regulatory T cells attenuate lipopolysaccharide-induced systemic inflammatory responses and promotes survival in murine Escherichia coli infection, Shock, 40(1): 65-73.

Parker, G.A., 2017, Immunology in Toxicology and Drug Development, USA: Humana Press.

Santegoets, S.J., Dijkgraaf, E.M., Battaglia, A., Beckhove, P., Britten, C.M., Gallimore, A., and van der Burg, S.H., 2015, Monitoring regulatory T cells in clinical samples: consensus on an essential marker set and gating strategy for regulatory T cell analysis by flow cytometry, Cancer Immunology, Immunotherapy, 64(10): 1271-1286.

Singh, K., Hjort, M., Thorvaldson, L., and Sandler, S., 2015, Concomitant analysis of Helios and Neuropilin-1 as a marker to detect thymic derived regulatory T cells in naive mice, Scientific reports, 5(1): 1-10.

Wing, J. B., Tanaka, A., and Sakaguchi, S., 2019, Human FOXP3+ Regulatory T Cell Heterogeneity and Function in Autoimmunity and Cancer, Immunity 80: 302-316.




DOI: https://doi.org/10.33508/jfst.v9i2.4079